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酶標(biāo)儀的檢定內(nèi)容包括哪些部分
更新時(shí)間:2020-06-25 點(diǎn)擊量:975
 
  酶標(biāo)儀在實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用越來越普及,酶標(biāo)儀的檢定也就越來越重要。酶標(biāo)儀的檢定內(nèi)容主要包括干涉濾光片波長誤差及重復(fù)性、吸光度誤差、穩(wěn)定性和重復(fù)性、儀器靈敏度、通道差異及吸光度的線性。
  吸光度示值穩(wěn)定性(r)的檢定:
  選用492nm波長或儀器*的專一波長,將吸光度標(biāo)稱值為1.0A的光譜中性濾光片,平放在微孔酶標(biāo)板的空板架上,以空氣為參比,測量并記錄酶標(biāo)儀的初始吸光度示值(A0),5min、10min后分別再測一次。吸光度示值穩(wěn)定性(r)計(jì)算:r等于后兩次吸光度示值的大值與A0的差。
  波長示值誤差和波長重復(fù)性的檢定:
  從酶標(biāo)儀取出儀器所用有標(biāo)稱波長(λ)的干涉濾光片(405,450,492,620nm),使用波長示值誤差優(yōu)于±0.5nm的分光光度計(jì),將干涉濾光片用1mm左右銅或鋁金屬絲懸掛固定于分光光度計(jì)比色杯架第二孔右外側(cè),干涉濾光片平面需與入射光束垂直。以1nm的改變幅度,從低到高,檢測各干涉濾光片在(±20)nm范圍內(nèi)的透射比,繪制波長一透射比特性曲線,求出峰值波長(λi),每片干涉濾光片重復(fù)檢測三次并求峰值波長均值。
  干涉濾光片波長示值誤差(△λ)計(jì)算:△λ=峰值波長均值-λ;波長重復(fù)性(δλ)計(jì)算:δλ等于三次檢測峰值波長大值和小值之差。
  吸光度示值誤差的檢定:
  先將吸光度標(biāo)稱值(A)分別為0.2,0.5,1.0,1.5的四塊光譜中性濾光片(分光光度計(jì)附件),在分光光度計(jì)上依次選用405,450,492,630nm波長或酶標(biāo)儀*的專一波長,以空氣為參比,檢測光譜中性濾光片的吸光度。每個(gè)濾光片每個(gè)波長檢測三次,取均值作為該片在該波長下的吸光度標(biāo)準(zhǔn)值(As)。然后,將四塊光譜中性濾光片同時(shí)平放在微孔酶標(biāo)板的空板架上,以空氣為參比,酶標(biāo)儀連續(xù)測量3次,依次記錄儀器吸光度示值,并計(jì)算平均值(Ax)。
  吸光度示值誤差(△A)計(jì)算:△A=Ax-As,取計(jì)算后的所有△A中的誤差大值作為該酶標(biāo)儀的吸光度示值誤差。
  吸光度重復(fù)性的檢定:
  按吸光度示值計(jì)算的方法將吸光度標(biāo)稱值(A)為0.5或1.0光譜中性濾光片,以空氣為參比,于酶標(biāo)儀微孔酶標(biāo)板的空板架某一固定孔位重復(fù)測定6次(n),記錄每一次吸光度(Xi),求吸光度均值,按下式計(jì)算RSD偏差值(RSD),以RSD表示儀器吸光度重復(fù)性。
  
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